İmmünohistokimya

İmmunohistokimya (IHC) toxuma bölməsinin hüceyrələrində spesifik antigenləri (zülalları) aşkar etmək üçün istifadə edilən güclü laboratoriya üsuludur. O, toxuma nümunələrində spesifik zülalları müəyyən etmək və tapmaq üçün immunologiya və mikroskopiya prinsiplərini birləşdirir, bu da onu tibbi tədqiqatların, diaqnostikanın və patologiyanın bir çox sahələrində vacib edir. Texnika xərçəng diaqnozunda, eləcə də müəyyən xəstəliklərin toxuma mənşəyini müəyyən etmək, şiş davranışını anlamaqda və müalicə qərarlarına rəhbərlik etməkdə geniş istifadə olunur.

İmmunohistokimya nədir?

İmmunohistokimya (IHC) bir toxuma bölməsinin hüceyrələrində spesifik antigenlərin mövcudluğunu aşkar etmək üçün istifadə olunan laboratoriya üsuludur. Antikorları antigenlərə bağlamaq üçün antigen-antikor qarşılıqlı əlaqəsi prinsipindən istifadə edir, antigenin mikroskop altında görünməsinə imkan verir.

IHC prosesi, toxuma nümunəsindəki spesifik antigenləri hədəfləmək və bağlamaq üçün ferment və ya flüoresan boya kimi aşkar edilə bilən markerlə işarələnmiş antikorların istifadəsini əhatə edir. Bu antikorlar aşkar etmək üçün nəzərdə tutulduqları antigen üçün yüksək dərəcədə spesifikdir və IHC-ni toxuma nümunələrində spesifik zülalları və ya markerləri müəyyən etmək üçün inanılmaz dərəcədə dəqiq bir üsula çevirir.

İmmunohistokimya necə işləyir?

İmmunohistokimyada iştirak edən əsas addımlar aşağıdakılardır:

1. Toxuma nümunəsinin hazırlanması: Doku nümunəsi (adətən biopsiyadan) yığılır və strukturunu qorumaq üçün sabitlənir. Sonra nümunə nazik hissələrə kəsilir və bir şüşə slaydın üzərinə qoyulur.
2. Antigen axtarışı: Zülalları və ya antigenləri antikorlara ifşa etmək üçün toxuma tez-tez istilik və ya kimyəvi maddələrlə müalicə olunur, çünki formaldehid fiksasiyası antigen yerlərini maskalaya bilər.
3. Antikor tətbiqi: Toxuma bölməsi xüsusi olaraq hədəf antigenə bağlanan əsas antikorla inkubasiya edilir.
4. İkincil antikor bağlanması: Sonra ikincil antikor tətbiq edilir, o, birincil antikora bağlanır və markerlə (məsələn, ferment və ya flüoresan boya) birləşir.
5. Aşkarlama: Toxuma ferment və ya markerlə reaksiya verən, antigenin yerində rəng dəyişikliyi və ya flüoresans əmələ gətirən bir substratla müalicə olunur. Bu, antigenin mikroskop altında görünməsinə imkan verir.
6. Təfsir: Patoloqlar boyama nümunələrini araşdıraraq nəticələri təhlil edirlər. Hədəf antigen varsa, toxuma antigenin yerini və bolluğunu göstərən rəng dəyişikliyi və ya flüoresan kimi spesifik boyanma nümayiş etdirəcəkdir.

İmmunohistokimya niyə aparılır?

İmmunohistokimya müxtəlif tətbiqlərə malik çox yönlü bir vasitədir, xüsusən də patoloji və diaqnostika sahəsində. Aşağıda IHC-nin həyata keçirilməsinin əsas səbəblərindən bəziləri verilmişdir:

• Xərçəngin diaqnozu və təsnifatı: IHC xərçənglərin diaqnozu və təsnifatında mühüm rol oynayır. Şiş hüceyrələri tez-tez xərçəng növünü və onun mənşəyini müəyyən etməyə kömək edən xüsusi markerləri ifadə edirlər. Məsələn, döş xərçəngi estrogen reseptorları (ER), progesteron reseptorları (PR) və HER2 kimi markerlərin ifadəsi əsasında təsnif edilə bilər. IHC ən təsirli müalicə variantlarını təyin etməyə kömək edən bu markerləri müəyyən edə bilər.
• Şişin mənşəyinin müəyyən edilməsi: IHC, toxuma nümunəsi asanlıqla müəyyən edilə bilmədiyi zaman şişin mənşəyini təyin etmək üçün istifadə olunur. Məsələn, limfa düyünlərində xərçəng aşkar edilərsə, IHC toxumaya məxsus markerləri aşkar edərək onun döş, kolon və ya ağciyərdən qaynaqlandığını müəyyən etməyə kömək edə bilər.
• Mərhələ Xərçəngi və Proqnozlaşdırma: IHC, xərçəng mərhələsini və proqnozunu təyin etməyə kömək edən toxumada xərçəng işğalının dərəcəsini qiymətləndirmək üçün istifadə olunur. O, həmçinin müəyyən zülalların ifadəsinə əsaslanaraq xərçəngin nə qədər aqressiv olduğunu təxmin etmək üçün istifadə edilə bilər.
• Otoimmün və yoluxucu xəstəliklər: IHC həmçinin lupus kimi otoimmün xəstəliklərin diaqnozu və ya bakteriya və ya virusların səbəb olduğu infeksiyaları müəyyən etmək üçün istifadə olunur. Müəyyən immun hüceyrələri və ya patogenlər toxuma nümunələrində xüsusi markerlərdən istifadə etməklə müəyyən edilə bilər.
• Araşdırma Məqsədləri: Tədqiqatda IHC hüceyrələrdə və toxumalarda zülalların ifadəsini öyrənmək üçün istifadə olunur. Bu, tədqiqatçılara xəstəliklərin necə inkişaf etdiyini və müxtəlif zülalların xəstəlik proseslərində necə qarşılıqlı əlaqədə olduğunu anlamağa kömək edə bilər. Dərman hazırlanmasında və terapevtik müdaxilələrin effektivliyini qiymətləndirmək üçün adətən istifadə olunur.

İmmunohistokimyaya necə hazırlaşmaq olar

İmmunohistokimyanın özü xüsusi xəstə hazırlığını tələb etmir, çünki bu, toxuma nümunələri üzərində aparılan diaqnostik testdir. Bununla belə, IHC testinə hazırlaşarkən aşağıdakı addımlar cəlb oluna bilər:

• Toxuma nümunəsinin toplanması: IHC testi adətən biopsiya və ya cərrahiyyə yolu ilə əldə edilən toxuma nümunəsi tələb edir. Əgər biopsiya lazımdırsa, həkiminiz toxuma nümunəsinin yerindən və ölçüsündən asılı olaraq lokal anesteziya, sedasyon və ya ümumi anesteziyadan ibarət olan proseduru izah edəcək.
• Xəstə Tarixi: Nəticələri şərh etmək üçün tibb işçinizi ətraflı tibbi tarixlə təmin etmək vacibdir. Ailənizdə xüsusi xərçəng və ya otoimmün xəstəliklər varsa, bu məlumatı paylaşmaq patoloqlara test üçün düzgün antikorları seçməyə kömək edir.
• Simptomların nəzərdən keçirilməsi: IHC üçün nümunə təqdim edəcək hər hansı bir biopsiya və ya cərrahi prosedura keçməzdən əvvəl həkiminiz analiz üçün xüsusi testlərin və markerlərin seçilməsinə rəhbərlik etmək üçün simptomlarınızın ətraflı nəzərdən keçirilməsini xahiş edə bilər.

Test nəticələrinin şərhi

İmmunohistokimya nəticələrinin təfsiri, təlim keçmiş patoloq tərəfindən təhlil edilən boyanmanın nümunəsi və intensivliyindən asılıdır. Nəzərə alınmalı əsas elementlər bunlardır:

• Boyanma intensivliyi:
  • Güclü boyama: Toxumada hədəf antigenin yüksək səviyyəsini göstərir.
  • Orta Boyanma: Antigenin orta səviyyədə olduğunu göstərir.
  • Zəif və ya ləkəsiz: Antigenin mövcud olmadığını və ya aşağı səviyyədə olmasını təklif edir.
• Boyanma yeri:
  • Sitoplazmik rəngləmə: Ləkə hüceyrənin sitoplazmasında aşkar edilərsə, bu, hədəf zülalın orada yerləşdiyini göstərir.
  • Nüvə Boyanması: Əgər ləkə nüvədədirsə, bu, hədəf zülalın hüceyrənin nüvəsində rol oynadığını göstərir.
  • Membran boyama: Hüceyrə membranında boyanma reseptor aktivliyini və ya yapışma molekullarını göstərə bilər.
• Boyanma Nümunəsi: Ləkələmə nümunəsi, o cümlədən diffuz və ya fokus olması, antigenin yayılmasını və bolluğunu qiymətləndirməyə kömək edir və xüsusi xərçəng və ya xəstəliklərin diaqnostikasında istifadə olunur.
• Xüsusi işarələr: Müxtəlif xəstəliklər xüsusi markerlərlə əlaqələndirilir. Məsələn, HER2 pozitivliyi döş xərçəngində müalicə variantlarını müəyyən etmək üçün çox vacibdir, CD markerləri isə müxtəlif lenfoma növlərini təsnif etməyə kömək edir.

İmmunohistokimya üçün Normal Aralıq

İmmunohistokimya spesifik antigenləri aşkar etmək üçün istifadə edilən üsul olduğundan, test nəticələri üçün ənənəvi “normal diapazon” yoxdur. Bunun əvəzinə, nəticələr hədəflənmiş antigenin nümunədə olub-olmamasına və ifadə nümunəsinə əsasən şərh edilir. Müəyyən bir marker üçün müsbət nəticə xərçəng və ya xəstəliyin mövcudluğunu göstərə bilər, mənfi nəticə isə onun yoxluğunu göstərə bilər. Şərh klinik kontekstdən və sınaqdan keçirilən xüsusi markerlərdən asılıdır.

İmmunohistokimyanın istifadəsi

İmmunohistokimya tibbi diaqnostikada geniş istifadə olunur, o cümlədən:

• Xərçəng diaqnozu və alt tipləri: IHC xərçəng növünü müəyyən etməyə, onun mənşəyini təyin etməyə və alt növünü (məsələn, döş xərçəngi, lenfoma) təsnif etməyə kömək edir.
• Şiş markerlərinin müəyyən edilməsi: Döş xərçəngində HER2 və ya müəyyən lenfoma növlərində CD20 kimi zülalların varlığını aşkar etmək üçün istifadə olunur.
• Otoimmün Xəstəliklərin Diaqnozu: IHC, lupus və ya romatoid artrit kimi otoimmün xəstəlikləri göstərən xüsusi immun hüceyrələrin və ya antikorların mövcudluğunu aşkar etməyə kömək edə bilər.
• Yoluxucu Xəstəliklərin Diaqnozu: IHC bakterial, viral və ya parazitar infeksiyalar da daxil olmaqla toxumalarda infeksiyaları müəyyən etmək üçün istifadə olunur.
• Araşdırma: Xəstəlik mexanizmlərini başa düşmək üçün toxumalarda və hüceyrələrdə zülal ifadəsini öyrənmək üçün tədqiqatlarda, xüsusən də dərmanların inkişafında istifadə olunur.
• Mərhələ Xərçəngi: IHC, xüsusilə xəstəliyin yayılma dərəcəsinin müəyyən edilməsinin kritik olduğu hallarda, xərçəngin mərhələsini təyin etməyə kömək edə bilər.

İmmunohistokimya haqqında 10 Tez-tez verilən sual

1. İmmunohistokimya nədir? İmmunohistokimya, toxuma hissələrində spesifik antigenləri aşkar etmək üçün antikorlardan istifadə edən laboratoriya üsuludur. O, xəstəliklərə, xüsusən də xərçəngə diaqnoz qoymaq və hüceyrələrdə xüsusi zülalların varlığını müəyyən etmək üçün istifadə olunur.
2. İmmunohistokimya necə aparılır? Doku nümunələri adətən biopsiya vasitəsilə toplanır. Daha sonra nümunə sınaqdan keçirilən zülallara xas olan antikorlarla müalicə olunur. Antigen varsa, o, antikora bağlanır və mikroskop altında təhlil edilən vizual bir siqnal yaradır.
3. İmmunohistokimya hansı şərtləri diaqnoz edə bilər? İmmunohistokimya xərçəngin (məsələn, döş, ağciyər və ya lenfoma), otoimmün xəstəliklərin və infeksiyaların diaqnozu üçün istifadə olunur. Xəstəliyi göstərə bilən antigenlərin varlığını və növünü təyin etməyə kömək edir.
4. Xərçəng diaqnozunda immunohistokimyanın rolu nədir? IHC xərçəng növlərinin diaqnostikası, alt tipləşdirmə və müvafiq müalicələrin təyin edilməsi üçün çox vacib olan HER2, estrogen reseptorları və progesteron reseptorları kimi şiş markerlərini müəyyən etməyə kömək edir.
5. İmmunohistokimya invazivdirmi? İmmunohistokimyanın özü invaziv deyil. Bununla belə, biopsiya və ya cərrahiyyə kimi prosedurlarla əldə edilən toxuma nümunəsi tələb olunur ki, bu da prosedurdan asılı olaraq bəzi narahatlıqları ehtiva edə bilər.
6. İmmunohistokimyadan nəticə əldə etmək üçün nə qədər vaxt lazımdır? IHC nəticələri testin mürəkkəbliyindən və əlavə təhlil ehtiyacından asılı olaraq adətən bir neçə gündən bir həftəyə qədər vaxt aparır.
7. İmmunohistokimyanın müsbət nəticəsi nə deməkdir? Müsbət nəticə hədəf antigenin toxuma nümunəsində tapıldığını göstərir. Xərçəng diaqnozunda bu, xərçəng markerinin varlığını ifadə edə bilər, otoimmün xəstəliklərdə isə spesifik immun hüceyrələrin varlığını təklif edə bilər.
8. İmmunohistokimyanın mənfi nəticəsi nə deməkdir? Mənfi nəticə, toxuma nümunəsində antigenin aşkar edilməməsi deməkdir. Xərçəng diaqnozunda bu, döş xərçəngində HER2 kimi xüsusi bir markerin olmadığını göstərə bilər.
9. İmmunohistokimya xərçəngin təyini üçün istifadə edilə bilərmi? Bəli, IHC şiş böyüməsinin dərəcəsini, yayılmasını və proqnoza və müalicə qərarlarına təsir edən xüsusi markerlərin ifadəsini müəyyən etməklə xərçəngin mərhələlərini təyin etməyə kömək edir.
10. İmmunohistokimya digər testlərdən nə ilə fərqlənir? Genetik testdən və ya molekulyar diaqnostikadan fərqli olaraq, İmmunohistokimya toxuma nümunələrində zülal ifadəsinə diqqət yetirir və bu, hüceyrə səviyyəsində şəraitin vizuallaşdırılması və diaqnozu üçün xüsusilə faydalıdır.

Nəticə

İmmunohistokimya müasir tibbdə xəstəliklərin, xüsusən də xərçəng və otoimmün vəziyyətlərin mövcudluğu və təbiəti haqqında dəyərli məlumatlar verən mühüm diaqnostika vasitəsidir. Xüsusi antigenləri aşkar edərək, patoloqlara vəziyyətləri, xərçəng mərhələsini dəqiq müəyyənləşdirməyə və hətta ən yaxşı müalicə kursunu təyin etməyə kömək edir. Prosedur invaziv olmasa da, toxuma nümunəsinin toplanması diqqətli hazırlıq və tibbi təcrübə tələb edə bilər.

İmmunohistokimya prosesini, onun istifadəsini və nəticələrin necə şərh edilməsini başa düşmək həm xəstələrə, həm də tibb işçilərinə diaqnoz və müalicə ilə bağlı məlumatlı qərarlar verməkdə kömək edə bilər. Xərçəng diaqnozu üçün IHC testindən keçməyinizdən asılı olmayaraq və ya tədqiqat işinin bir hissəsi olaraq, bu üsul tibbi diaqnostikanın və davam edən tədqiqatın təməl daşıdır.