库姆斯试验（抗球蛋白试验）：直接和间接 DCT/ICT 详解

关键外卖

• 直接库姆斯试验检查的是红细胞本身；间接库姆斯试验检查的是血浆。
• 库姆斯试验呈阳性本身并不能确诊，健康人以及感染者、自身免疫性疾病患者或近期接受过输血的人，即使没有明显的溶血，也可能出现阳性结果。
• 库姆斯试验阴性并不能排除溶血；一些免疫性溶血性贫血的库姆斯试验结果为阴性，而印度的许多溶血性贫血是非免疫性的（地中海贫血、G6PD 缺乏症、镰状细胞病）。
• 库姆斯试验不能测量溶血的严重程度，血红蛋白、网织红细胞计数、乳酸脱氢酶、胆红素和结合珠蛋白才能测量溶血的严重程度。
• 库姆斯试验是一种常规的静脉抽血试验，通常只需在采样柜台花几分钟时间即可完成。

一目了然

也被称为

• 抗球蛋白试验正式名称。
• DCT / DAT直接抗球蛋白试验或直接抗球蛋白试验。
• 信息通信技术/工业自动化间接抗球蛋白试验或间接抗球蛋白试验。
• 抗体筛查：输血和产前工作中间接检测的常用实验室名称。
• 在印度的诊所和产前检查卡上，患者经常会听到“妊娠期 ICT 检测”、“Rh 抗体检测”或简称“Coombs 检测”。

库姆斯试验是什么

红细胞表面可能覆盖着免疫系统产生的抗体。这些抗体分子太小，无法使红细胞自行聚集。库姆斯试剂（抗人球蛋白）能使这些抗体相互连接，从而产生肉眼可见的凝集现象。

直接抗人球蛋白试验（DCT）：将患者自身的红细胞洗涤后与抗人球蛋白混合。凝集反应表明抗体或补体已存在于体内细胞表面。

间接抗人球蛋白试验（ICT）：将患者的血浆或血清与已知抗原类型的待测红细胞进行孵育。凝集反应表明存在游离抗体，该抗体可能攻击输注的细胞，或在妊娠期间通过胎盘。

实验室可能采用试管法、凝胶卡法（柱凝集法）或固相法。不同方法的灵敏度和分级标准各不相同，因此不同实验室的结果并非总能直接比较。

为什么要进行库姆斯试验

• 疑似免疫性溶血性贫血： 贫血伴黄疸、尿色深、网织红细胞计数高或 LDH 升高。
• 新生儿黄疸或贫血： 脐带血或新生儿血的DCT，可能引起因Rh或ABO血型不合引起的胎儿和新生儿溶血病（HDFN）。
• 产前护理： 对 Rh D 阴性妇女进行 ICT（抗体筛查），并根据产科方案对其他妇女进行 ICT（抗体筛查），以检测红细胞同种抗体。
• 输血前： 间接抗球蛋白技术是抗体筛查和交叉配型的基础。
• 疑似输血反应： 输血后DCT有助于识别输注细胞的免疫破坏。
• 疑似药物引起的免疫性溶血： 例如某些头孢菌素、青霉素、甲基多巴或哌拉西林。

哪些人应该接受这项测试

• 患有不明原因贫血，并伴有红细胞分解的特征，眼睛发黄，尿液呈深色或可乐色，疲劳程度与失血量不成比例。
• Rh D 阴性孕妇（作为标准产前抗体筛查的一部分）以及有既往妊娠受影响史或既往输血史的妇女。
• 新生儿在出生后 24 小时内出现黄疸、胆红素迅速升高或贫血，尤其是当母亲为 Rh D 阴性或 O 型血时。
• 输血后出现发热、寒战、背痛、尿色深或血红蛋白下降的患者。
• 患有自身免疫性疾病（如狼疮）、慢性淋巴细胞白血病、淋巴瘤的人，或者接受干细胞或器官移植后出现贫血的人。
• 服用已知与免疫溶血相关的药物的患者出现不明原因的贫血。

库姆斯试验并非健康人群的常规体检或筛查试验。

库姆斯试验无法检测或排除的情况

• 它不能测量溶血。 DCT 阳性结果仅表明细胞被抗体包裹，而非细胞正在被破坏，也无法反映细胞被破坏的速度。血红蛋白、网织红细胞、乳酸脱氢酶 (LDH)、间接胆红素和结合珠蛋白是判断细胞破坏速度所必需的。
• 即使结果为阴性，也不能排除免疫性溶血。 如果出现 Coombs 阴性自身免疫性溶血性贫血，抗体水平可能低于该方法的检测阈值，或者抗体可能是 IgA 或温 IgM，而标准试剂可能无法检测到。
• 它没有提及非免疫性疾病的原因。 地中海贫血、镰状细胞病、G6PD 缺乏症、遗传性球形红细胞症、疟疾、机械瓣膜溶血、蛇咬伤和微血管病都会导致溶血，但 Coombs 试验结果为阴性。
• 它无法识别抗体。 ICT 检测结果呈阳性需要抗体鉴定板来确定特异性（抗 D、抗 c、抗 K 等）。
• 它不能预测胎儿病情严重程度。 产前 ICT 检测呈阳性并不能告诉你胎儿是否受到影响或受影响的程度；需要抗体滴度、大脑中动脉多普勒检查和产科专家的评估。
• 它不能诊断狼疮、类风湿性关节炎或任何自身免疫性疾病。 较早的患者资料往往会夸大这种现象。库姆斯试验仅表明存在影响红细胞的免疫过程。

阴性结果表示实验室未检测到某种物质，而不是体内缺少某种物质。如果库姆斯试验结果正常但症状仍然存在，请返回之前为您开具该项检查的医生处就诊。

相关但不同的考试

这些检查回答不同的问题。先做哪项检查取决于具体情况：Rh D 阴性母亲所生的黄疸新生儿需要尽早进行透析凝集试验 (DCT)；来自地中海贫血流行区、患有终身贫血的年轻男性需要先进行血涂片和高效液相色谱 (HPLC) 检查；输血过程中病情恶化的患者需要紧急进行输血后透析凝集试验 (DCT) 和病历核查。

如何准备

• 无需禁食 进行库姆斯试验时，如果同时进行血脂或血糖检测，请遵循相应的空腹说明。
• 请携带输血史。 最近三个月内的输血史、既往输血反应史以及血库出具的任何抗体卡都很重要，如果有的话请随身携带。
• 请携带孕期及产科病史。 包括既往 Rh 免疫球蛋白（抗 D）注射日期、流产、终止妊娠、羊膜穿刺术和既往受影响的婴儿。
• 列出所有药品和保健品， 包括近期服用的抗生素以及任何AYUSH（印度传统医学）或非处方药。请勿为了准备这项检查而停止或更改任何处方药，请先咨询您的处方医生。
• 保湿 通常情况下，这会使静脉穿刺更容易，除非您的医生对您进行了液体限制。

不同实验室和血库使用的样本管类型、凝胶法与试管法，以及DCT是否自动扩展至IgG和C3d分型，均有所不同。您所在实验室的书面操作规程优先于任何通用指南。

怀孕

抽血本身与其他静脉穿刺一样，存在一些轻微风险。抗体筛查和抗D预防性用药的时间安排遵循治疗单位的产前方案。如果近期注射过抗D，请告知实验室，因为这可能会导致后续的免疫层析试验（ICT）结果呈阳性。

新生儿和儿童

新生儿通常采集脐带血或足跟血/静脉血。样本量较小。哭闹、瘀青和轻微的穿刺痕迹都很常见，通常会自行消退。

老年人和静脉脆弱的人群

出现瘀青的可能性更大。请告知抽血员您正在服用血液稀释剂，以便抽血后可以施加更大、更持久的压力。

测试过程中会发生什么，需要多长时间？

• 注册和身份验证： 姓名、血型、医院编号。这一步骤在输血检测中至关重要，绝不能省略。
• 抽血： 止血带、皮肤清洁后，将针头插入手臂静脉。抽取一到两管血液样本。整个抽血过程通常需要一到三分钟。
• 在柜台停留的总时间： 门诊病人通常需要 5-10 分钟，如果科室繁忙或静脉难找，则需要更长时间。
• 实验室工作： 细胞经洗涤后，加入抗人球蛋白，然后通过人工或自动凝胶卡系统读取凝集反应结果。阳性结果可使用单克隆IgG和C3d试剂、洗脱实验或抗体鉴定板进行进一步验证，但这会增加实验时间。

报告出具时间取决于检测项目是常规检测、产前检测还是紧急输血前检测，以及实验室的工作流程。请向您的实验室询问报告何时可以出具。

了解您的库姆斯测试报告

报告通常是定性的：阳性或阴性，有时还会给出凝集强度等级和检测到的涂层类型。

直接库姆斯测试

阳性：抗体和/或补体包被红细胞。可能的原因包括自身免疫性溶血性贫血（温型或冷型）、新生儿溶血病、迟发性或急性溶血性输血反应、药物诱导的免疫性溶血，或潜在的淋巴增生性疾病或自身免疫性疾病。即使没有溶血，某些健康献血者和住院患者也可能出现DCT阳性。

阴性：未检测到包被物。免疫性溶血的可能性降低，但不能完全排除，非免疫性原因仍然完全有可能。

间接库姆斯试验

阳性：存在游离红细胞抗体。在妊娠期，这可能提示同种免疫，需要进行抗体鉴定、滴度测定和胎儿监护。输血前，这意味着必须特别挑选相容的血液制品，这可能需要更长时间才能安排好。

阴性：采用该方法未检测到抗体。但这并不排除未来输血或妊娠后出现抗体反应的可能性。

分级（例如 1+ 至 4+）反映了技术人员观察到的或分析仪读取的凝集强度。这是一种半定量、依赖于检测方法的观察结果。更高的分级并不一定意味着更严重的疾病，患者常常会过度解读这些数值。任何 Coombs 试验结果都不应单独解读，必须由要求进行该项检查的医生结合血红蛋白、网织红细胞计数、血涂片、胆红素、乳酸脱氢酶 (LDH) 以及临床表现进行解读。

库姆斯试验结果何时可能具有误导性

假阳性或临床意义不大的阳性

• 近期抗D免疫球蛋白 妊娠期可导致母体 ICT 呈阳性，新生儿 DCT 呈弱阳性。
• Drugs. 例如甲基多巴、一些头孢菌素和青霉素以及哌拉西林-他唑巴坦可以包裹细胞或引发抗体。
• 静脉注射免疫球蛋白、抗胸腺细胞球蛋白和一些单克隆抗体疗法 （例如达雷妥尤单抗）可能会干扰抗球蛋白检测。
• 近期输血 留下的是供体细胞和患者细胞的混合群体，这使得结果难以解释。
• 高血浆球蛋白：例如多发性骨髓瘤、慢性感染或慢性肝病，都可能导致非特异性阳性。
• 冷凝集素、洗涤不充分或检测延迟 样本中的某些成分可能会产生假性凝集反应。

假阴性或检测结果较弱

• 低密度抗体包被 低于该方法的检测限，见于某些真正的自身免疫性溶血性贫血。
• IgA 或温 IgM 抗体， 一些标准多特异性试剂可能无法检测到。
• 前带效应 细胞过度清洗，或试剂质量和储存问题。
• 快速溶血 其中，包膜最厚的细胞已被破坏和清除。
• 凝固的或陈旧的样本， 或者样本取自错误的试管。

由于这些影响，有时需要通过重复测试、单特异性试剂、洗脱研究或转诊至参考免疫血液学实验室来解决不一致的结果。

风险与安全

抽血

风险与常规静脉穿刺相同：短暂疼痛、瘀青、头晕，以及罕见的少量血肿或局部感染。服用抗凝血剂或抗血小板药物时更容易出现瘀青。

新生儿采样

脐带血采样不会给婴儿带来任何风险。足跟采血或静脉采血只会引起短暂的不适和偶尔的瘀伤。

解读相关风险

库姆斯试验的主要风险并非物理性的，而是解读上的，即在未确认是否发生溶血的情况下就根据阳性结果采取行动，或者因为结果为阴性而停止寻找病因。试验结果会因个体临床情况而异。

特殊情况

怀孕

间接抗人球蛋白试验（Coombs试验）是产前抗体筛查。Rh D阴性女性接受筛查，并根据所在科室的产科方案，在妊娠的特定阶段以及分娩、流产、终止妊娠或腹部外伤后，酌情给予抗D预防性治疗。需记录每次抗D用药情况。既往已致敏的女性无法通过抗D预防，需要接受胎儿医学专科的后续随访。

新生儿

脐带血或新生儿血的DCT试验有助于解释早期黄疸或贫血的发生。ABO血型不合（母亲O型血，婴儿A型或B型血）即使存在真正的溶血，也常常导致DCT试验结果弱或阴性，因此胆红素变化趋势和血象比单纯的DCT试验结果更为重要。治疗方案可能包括光疗、密切监测胆红素水平、静脉注射免疫球蛋白或换血疗法，具体由新生儿团队决定。

近期输血患者

输血后数天至数周内进行的DCT检测可能反映的是供体细胞，因此难以解读。请告知实验室最后一次输血的日期。

患有自身免疫性疾病或血液癌症的人

系统性红斑狼疮、慢性淋巴细胞白血病和淋巴瘤均与继发性自身免疫性溶血性贫血相关。此时，DCT阳性提示需评估原发疾病，而非做出新的诊断。

老年人

随着年龄增长、服用多种药物以及住院治疗，无溶血的DCT阳性结果更为常见。因此，解读结果时必须谨慎。

服用多种药物的人

切勿自行停用疑似引起免疫溶血的药物。任何关于更改或停用与免疫溶血相关的药物的决定，均由处方医生做出。

印度背景下的库姆斯试验

• 非免疫性溶血很常见。 β-地中海贫血基因携带者、镰状细胞贫血和G6PD缺乏症在印度部分人群中较为常见。这些患者的Coombs试验通常为阴性，而高效液相色谱血红蛋白测定、G6PD活性测定以及家族史是重要的诊断依据。对于慢性贫血患儿，Coombs试验阴性应促使进一步检查，而非排除上述疾病。
• 感染很重要。 疟疾、登革热和其他急性感染可导致贫血和黄疸，但 Coombs 试验结果为阴性；有些感染还可能出现短暂的阳性结果。
• 产前检查。 Rh D 阴性血型检测和抗体筛查是印度产前检查的常规项目，抗 D 抗体预防性治疗也广泛普及。产前检查卡上记录的抗 D 抗体检测日期可以避免后续免疫层析试验（ICT）结果呈阳性时造成的混淆。
• 多次输血患者。 接受定期输血的地中海贫血患儿和成人有产生红细胞同种抗体的真正风险，因此抗体筛查和扩大配型非常重要。
• 监管与隐私。 印度的血库和输血服务机构均按照《药品和化妆品规则》以及国家输血委员会的标准运营。通过医院表格或门户网站收集的任何个人数据均根据《2023年数字个人数据保护法》进行处理。

印度的成本和保险

与影像学或分子检测相比，库姆斯试验是一种价格相对低廉的血液检测，但不同政府机构、血库、独立实验室和私立医院的收费差异很大。与其直接给出一个具体数字，不如了解影响价格的因素更有意义。

• 订购了哪项检测？ 单独进行 DCT 检测比进行 DCT 检测加上单特异性 IgG/C3d 分型、洗脱和抗体鉴定检测要便宜。
• 使用的方法： 传统试管技术比自动化凝胶卡或固相系统更便宜。
• 紧迫性： 紧急和非工作时间办理的业务通常会收取更高的费用。
• 捆绑： 产前检查和输血前检查通常包括抗球蛋白测试，并包含在套餐价格中。
• 设置： 政府医院和公共血库通常提供免费或象征性收费的检测；私立认证实验室收费更高。
• 保险： 如果在住院期间或作为承保的产科或输血治疗的一部分进行，该项检查通常包含在保险范围内。门诊诊断检查通常不予报销，除非您的保单包含门诊福利。请在进行检查前与您的保险公司或医院收费处确认。

神话与事实

常见问题

直接Coombs试验和间接Coombs试验有什么区别？

直接库姆斯试验检测患者自身红细胞上是否已附着抗体或补体。间接库姆斯试验检测血浆中是否存在可能攻击红细胞的游离抗体。直接试验用于溶血和新生儿黄疸的诊断；间接试验用于产前筛查和输血相容性检查。

库姆斯试验呈阳性就一定意味着贫血吗？

不。直接抗人球蛋白试验（Coombs试验）阳性表明红细胞表面有抗体包被，并不代表红细胞正在被破坏。有些试验结果呈阳性的人血红蛋白水平完全正常。主治医生会通过网织红细胞计数、乳酸脱氢酶（LDH）、胆红素、结合珠蛋白以及外周血涂片来确认是否确实发生了溶血。

为什么孕期要进行ICT检测？

间接抗人球蛋白试验（Coombs试验）用于筛查可穿过胎盘并损伤胎儿红细胞的红细胞抗体，这些抗体可导致胎儿和新生儿溶血病。对于Rh D阴性血型的女性以及既往接受过输血的患者，筛查尤为重要。筛查结果呈阳性将提示需要进行抗体鉴定和专业的胎儿监护。

做库姆斯试验前需要空腹吗？

库姆斯试验无需空腹。如果同一次抽血检查还包括空腹血糖或血脂检查，请遵循这些检查的空腹要求。除非您的医生另有指示，否则请继续服用所有处方药物，并向实验室提供药物清单。

库姆斯试验会痛吗？

库姆斯试验只需从手臂静脉抽取少量血液即可。大多数人在针头插入时会感到短暂的刺痛，之后便无其他感觉。穿刺部位可能会出现轻微酸痛或小块淤青，持续一两天。按压穿刺部位几分钟即可减轻淤青。

药物会导致库姆斯试验出现假阳性结果吗？

是的。甲基多巴、某些青霉素类和头孢菌素类药物、哌拉西林-他唑巴坦、静脉注射免疫球蛋白以及某些单克隆抗体疗法都可能导致抗球蛋白检测呈阳性。请务必告知实验室和您的医生您正在服用的所有药物和补充剂。切勿自行停用任何处方药，是否需要调整用药由处方医生决定。

如果新生儿的库姆斯试验呈阳性怎么办？

新生儿直接抗人球蛋白试验（Coombs试验）阳性提示母体抗体包被婴儿的红细胞。新生儿团队会密切监测胆红素和血红蛋白水平。治疗方案取决于病情严重程度，可能包括光疗、密切观察、静脉注射免疫球蛋白，或在极少数情况下进行换血疗法。许多试验结果呈阳性的婴儿只需进行观察。

库姆斯试验能检测出地中海贫血或G6PD缺乏症吗？

不。地中海贫血、镰状细胞贫血和G6PD缺乏症是非免疫性红细胞破坏原因，Coombs试验结果为阴性。对于这些在印度部分地区常见的疾病，应进行血红蛋白高效液相色谱或电泳、G6PD酶活性测定、外周血涂片检查以及询问家族史等检查。

库姆斯试验需要多长时间？

抽血本身通常只需五到十分钟，包括登记在册。简单的定性检测结果实验室处理速度较快，而单克隆抗体分型、洗脱或抗体鉴定等检测则需要更长时间。紧急输血前检测会优先处理。请咨询您的实验室，了解您的具体报告何时出具。

来源

• AABB。 技术手册直接和间接抗球蛋白检测的标准和方法。
• 英国血液学会。自身免疫性溶血性贫血的治疗指南和输血前相容性检查程序。
• 印度国家输血委员会/国家艾滋病控制组织，输血服务标准。
• 印度妇产科协会联合会 (FOGSI) 关于 Rh 阴性妊娠和抗 D 预防的良好临床实践建议。
• 印度儿科学会/国家新生儿论坛，关于新生儿高胆红素血症的指导意见。