Immunhistochemie

Immunhistochemie (IHC) ist eine leistungsstarke Labortechnik, mit der spezifische Antigene (Proteine) in Zellen eines Gewebeschnitts nachgewiesen werden. Sie kombiniert die Prinzipien der Immunologie und Mikroskopie, um spezifische Proteine ​​in Gewebeproben zu identifizieren und zu lokalisieren, und ist daher in vielen Bereichen der medizinischen Forschung, Diagnostik und Pathologie unverzichtbar. Die Technik wird häufig in der Krebsdiagnose sowie zur Identifizierung der Gewebeursprünge bestimmter Krankheiten eingesetzt und hilft dabei, das Tumorverhalten zu verstehen und Behandlungsentscheidungen zu treffen.

Was ist Immunhistochemie?

Immunhistochemie (IHC) ist eine Labortechnik, mit der das Vorhandensein spezifischer Antigene in Zellen eines Gewebeschnitts nachgewiesen wird. Dabei wird das Prinzip der Antigen-Antikörper-Wechselwirkung genutzt, um Antikörper an Antigene zu binden, sodass das Antigen unter dem Mikroskop sichtbar gemacht werden kann.

Bei der IHC werden Antikörper verwendet, die mit einem erkennbaren Marker wie einem Enzym oder einem fluoreszierenden Farbstoff markiert sind, um bestimmte Antigene in einer Gewebeprobe anzuvisieren und zu binden. Diese Antikörper sind hochspezifisch für das Antigen, das sie erkennen sollen, was die IHC zu einer unglaublich präzisen Methode zur Identifizierung bestimmter Proteine ​​oder Marker in Gewebeproben macht.

Wie funktioniert Immunhistochemie?

Die grundlegenden Schritte der Immunhistochemie sind wie folgt:

1. Vorbereitung der Gewebeprobe: Die Gewebeprobe (normalerweise aus einer Biopsie) wird entnommen und fixiert, um ihre Struktur zu erhalten. Anschließend wird die Probe in dünne Scheiben geschnitten und auf einen Objektträger gelegt.
2. Antigen-Rückgewinnung: Das Gewebe wird häufig mit Hitze oder Chemikalien behandelt, um die Proteine ​​oder Antigene den Antikörpern auszusetzen, da die Formaldehydfixierung Antigenstellen maskieren kann.
3. Antikörperanwendung: Der Gewebeschnitt wird mit einem Primärantikörper inkubiert, der spezifisch an das Zielantigen bindet.
4. Sekundäre Antikörperbindung: Anschließend wird ein Sekundärantikörper aufgetragen, der an den Primärantikörper bindet und mit einem Marker (etwa einem Enzym oder einem Fluoreszenzfarbstoff) konjugiert ist.
5. Erkennung: Das Gewebe wird mit einem Substrat behandelt, das mit dem Enzym oder Marker reagiert und an der Stelle des Antigens eine Farbänderung oder Fluoreszenz erzeugt. Dadurch kann das Antigen unter dem Mikroskop sichtbar gemacht werden.
6. Interpretation: Pathologen analysieren die Ergebnisse, indem sie die Färbemuster untersuchen. Wenn das Zielantigen vorhanden ist, weist das Gewebe eine spezifische Färbung auf, entweder als Farbänderung oder Fluoreszenz, die den Ort und die Häufigkeit des Antigens anzeigt.

Warum wird eine Immunhistochemie durchgeführt?

Die Immunhistochemie ist ein vielseitiges Instrument mit vielfältigen Anwendungsmöglichkeiten, insbesondere im Bereich der Pathologie und Diagnostik. Im Folgenden sind einige der Hauptgründe für die Durchführung einer Immunhistochemie aufgeführt:

• Krebsdiagnose und -klassifizierung: IHC spielt eine wichtige Rolle bei der Diagnose und Klassifizierung von Krebs. Tumorzellen exprimieren oft spezifische Marker, die helfen können, die Art des Krebses und seinen Ursprung zu identifizieren. Beispielsweise kann Brustkrebs anhand der Expression von Markern wie Östrogenrezeptoren (ER), Progesteronrezeptoren (PR) und HER2 klassifiziert werden. IHC kann diese Marker identifizieren und dabei helfen, die wirksamsten Behandlungsoptionen zu bestimmen.
• Identifizierung des Tumorursprungs: IHC wird verwendet, um den Ursprung eines Tumors zu bestimmen, wenn die Gewebeprobe nicht leicht zu identifizieren ist. Wenn beispielsweise ein Krebs in einem Lymphknoten entdeckt wird, kann IHC durch die Erkennung gewebespezifischer Marker dabei helfen, festzustellen, ob er aus der Brust, dem Dickdarm oder der Lunge stammt.
• Krebsstadien bestimmen und Prognose vorhersagen: Mithilfe der IHC lässt sich das Ausmaß der Krebsinvasion im Gewebe beurteilen, was bei der Bestimmung des Krebsstadiums und der Prognose hilft. Anhand der Expression bestimmter Proteine ​​kann damit auch vorhergesagt werden, wie aggressiv der Krebs sein könnte.
• Autoimmun- und Infektionskrankheiten: Die IHC wird auch zur Diagnose von Autoimmunerkrankungen wie Lupus oder zur Identifizierung von Infektionen durch Bakterien oder Viren eingesetzt. Bestimmte Immunzellen oder Krankheitserreger können anhand spezifischer Marker in Gewebeproben identifiziert werden.
• Forschungszwecke: In der Forschung wird IHC verwendet, um die Expression von Proteinen in Zellen und Geweben zu untersuchen. Dies kann Forschern helfen zu verstehen, wie sich Krankheiten entwickeln und wie verschiedene Proteine ​​bei Krankheitsprozessen interagieren. Es wird häufig in der Arzneimittelentwicklung und zur Bewertung der Wirksamkeit therapeutischer Eingriffe verwendet.

So bereiten Sie sich auf die Immunhistochemie vor

Die Immunhistochemie selbst erfordert keine spezielle Patientenvorbereitung, da es sich um einen diagnostischen Test handelt, der an Gewebeproben durchgeführt wird. Die Vorbereitung auf einen IHC-Test kann jedoch die folgenden Schritte umfassen:

• Entnahme von Gewebeproben: Für einen IHC-Test ist eine Gewebeprobe erforderlich, die normalerweise durch eine Biopsie oder Operation gewonnen wird. Wenn eine Biopsie erforderlich ist, erklärt Ihnen Ihr Arzt das Verfahren, das je nach Ort und Größe der Gewebeprobe eine Lokalanästhesie, Sedierung oder Vollnarkose umfassen kann.
• Patientengeschichte: Für die Interpretation der Ergebnisse ist es wichtig, dass Sie Ihrem Arzt eine detaillierte Krankengeschichte mitteilen. Wenn in Ihrer Familie bestimmte Krebsarten oder Autoimmunerkrankungen aufgetreten sind, hilft die Weitergabe dieser Informationen den Pathologen dabei, die richtigen Antikörper für den Test auszuwählen.
• Überprüfung der Symptome: Bevor Ihr Arzt einer Biopsie oder einem chirurgischen Eingriff unterzogen wird, bei dem die Probe für die IHC gewonnen wird, wird er Sie möglicherweise um eine detaillierte Überprüfung Ihrer Symptome bitten, um die Auswahl spezifischer Tests und Marker für die Analyse zu erleichtern.

Interpretation der Testergebnisse

Die Interpretation der Ergebnisse der Immunhistochemie hängt vom Muster und der Intensität der Färbung ab, die von einem ausgebildeten Pathologen analysiert wird. Die wichtigsten zu berücksichtigenden Elemente sind:

• Färbeintensität:
  • Starke Färbung: Zeigt eine hohe Konzentration des Zielantigens im Gewebe an.
  • Mäßige Verfärbung: Zeigt eine mäßige Präsenz des Antigens an.
  • Schwache oder keine Färbung: Legt nahe, dass das Antigen nicht oder nur in geringen Mengen vorhanden ist.
• Färbeort:
  • Zytoplasmatische Färbung: Wenn der Fleck im Zytoplasma der Zelle gefunden wird, deutet dies darauf hin, dass sich das Zielprotein dort befindet.
  • Kernfärbung: Wenn sich die Färbung im Zellkern befindet, deutet dies darauf hin, dass das Zielprotein im Zellkern eine Rolle spielt.
  • Membranfärbung: Verfärbungen auf der Zellmembran können auf Rezeptoraktivität oder Adhäsionsmoleküle hinweisen.
• Färbungsmuster: Das Färbemuster, einschließlich der Angabe, ob die Färbung diffus oder fokal ist, hilft bei der Beurteilung der Verteilung und Häufigkeit des Antigens und wird zur Diagnose bestimmter Krebsarten oder Krankheiten verwendet.
• Spezifische Marker: Verschiedene Krankheiten sind mit bestimmten Markern verbunden. So ist beispielsweise die HER2-Positivität entscheidend für die Bestimmung der Behandlungsmöglichkeiten bei Brustkrebs, während CD-Marker dabei helfen, verschiedene Arten von Lymphomen zu klassifizieren.

Normalbereich für Immunhistochemie

Da die Immunhistochemie eine Technik zum Nachweis spezifischer Antigene ist, gibt es keinen traditionellen „Normalbereich“ für Testergebnisse. Stattdessen werden die Ergebnisse basierend darauf interpretiert, ob das Zielantigen in der Probe vorhanden ist und welches Expressionsmuster vorliegt. Ein positives Ergebnis für einen bestimmten Marker kann auf das Vorhandensein von Krebs oder einer anderen Krankheit hinweisen, während ein negatives Ergebnis auf deren Abwesenheit hinweisen kann. Die Interpretation hängt vom klinischen Kontext und den getesteten spezifischen Markern ab.

Anwendungen der Immunhistochemie

Die Immunhistochemie findet in der medizinischen Diagnostik vielfältige Anwendung, unter anderem:

• Krebsdiagnose und Subtypisierung: Mithilfe der IHC lässt sich die Krebsart identifizieren, ihre Herkunft bestimmen und ihr Subtyp (z. B. Brustkrebs, Lymphom) klassifizieren.
• Identifizierung von Tumormarkern: Es wird verwendet, um das Vorhandensein von Proteinen wie HER2 bei Brustkrebs oder CD20 bei bestimmten Arten von Lymphomen festzustellen.
• Diagnose von Autoimmunerkrankungen: Mittels IHC lässt sich das Vorhandensein spezifischer Immunzellen oder Antikörper feststellen, die auf Autoimmunerkrankungen wie Lupus oder rheumatoide Arthritis hinweisen.
• Diagnose einer Infektionskrankheit: IHC wird verwendet, um Infektionen in Geweben zu identifizieren, einschließlich bakterieller, viraler oder parasitärer Infektionen.
• Forschung: Es wird in der Forschung häufig verwendet, um die Proteinexpression in Geweben und Zellen zu untersuchen und so Krankheitsmechanismen zu verstehen, insbesondere bei der Arzneimittelentwicklung.
• Stadienbestimmung bei Krebs: IHC kann bei der Bestimmung des Krebsstadiums hilfreich sein, insbesondere in Fällen, in denen die Bestimmung des Ausmaßes der Ausbreitung der Krankheit von entscheidender Bedeutung ist.

10 häufig gestellte Fragen zur Immunhistochemie

1. Was ist Immunhistochemie? Immunhistochemie ist eine Labortechnik, bei der Antikörper verwendet werden, um bestimmte Antigene in Gewebeschnitten zu erkennen. Sie wird zur Diagnose von Krankheiten, insbesondere Krebs, und zur Identifizierung des Vorhandenseins bestimmter Proteine ​​in Zellen verwendet.
2. Wie wird eine Immunhistochemie durchgeführt? Gewebeproben werden entnommen, normalerweise durch eine Biopsie. Die Probe wird dann mit Antikörpern behandelt, die spezifisch für die zu testenden Proteine ​​sind. Wenn das Antigen vorhanden ist, bindet es sich an den Antikörper und erzeugt ein visuelles Signal, das unter dem Mikroskop analysiert wird.
3. Welche Erkrankungen können mittels Immunhistochemie diagnostiziert werden? Die Immunhistochemie wird zur Diagnose von Krebs (wie Brust-, Lungen- oder Lymphomkrebs), Autoimmunerkrankungen und Infektionen eingesetzt. Sie hilft bei der Bestimmung des Vorhandenseins und der Art von Antigenen, die auf eine Krankheit hinweisen können.
4. Welche Rolle spielt die Immunhistochemie bei der Krebsdiagnose? IHC hilft bei der Identifizierung von Tumormarkern wie HER2, Östrogenrezeptoren und Progesteronrezeptoren, die für die Diagnose von Krebsarten, die Subtypisierung und die Bestimmung geeigneter Behandlungen von entscheidender Bedeutung sind.
5. Ist Immunhistochemie invasiv? Die Immunhistochemie selbst ist nicht invasiv. Allerdings wird hierfür eine Gewebeprobe benötigt, die durch Verfahren wie eine Biopsie oder eine Operation gewonnen wird, was je nach Verfahren mit einigen Unannehmlichkeiten verbunden sein kann.
6. Wie lange dauert es, bis die Ergebnisse der Immunhistochemie vorliegen? Abhängig von der Komplexität des Tests und der Notwendigkeit weiterer Analysen dauern die IHC-Ergebnisse in der Regel einige Tage bis eine Woche.
7. Was bedeutet ein positives Immunhistochemie-Ergebnis? Ein positives Ergebnis zeigt an, dass das Zielantigen in der Gewebeprobe gefunden wurde. Bei der Krebsdiagnose könnte dies das Vorhandensein eines Krebsmarkers bedeuten, während es bei Autoimmunerkrankungen auf das Vorhandensein spezifischer Immunzellen hinweisen könnte.
8. Was bedeutet ein negatives Immunhistochemie-Ergebnis? Ein negatives Ergebnis bedeutet, dass das Antigen in der Gewebeprobe nicht nachgewiesen wurde. Bei der Krebsdiagnostik kann dies darauf hinweisen, dass ein bestimmter Marker, wie z. B. HER2 bei Brustkrebs, fehlt.
9. Kann die Immunhistochemie zur Stadienbestimmung von Krebs eingesetzt werden? Ja, die IHC hilft bei der Stadienbestimmung von Krebs, indem sie das Ausmaß des Tumorwachstums und der Ausbreitung sowie die Expression spezifischer Marker identifiziert, die die Prognose und Behandlungsentscheidungen beeinflussen.
10. Wie unterscheidet sich die Immunhistochemie von anderen Tests? Im Gegensatz zu genetischen Tests oder der molekularen Diagnostik konzentriert sich die Immunhistochemie auf die Proteinexpression in Gewebeproben und ist daher besonders nützlich für die Visualisierung und Diagnose von Zuständen auf zellulärer Ebene.

Fazit

Die Immunhistochemie ist ein unverzichtbares Diagnoseinstrument in der modernen Medizin und liefert wertvolle Erkenntnisse über das Vorhandensein und die Art von Krankheiten, insbesondere Krebs und Autoimmunerkrankungen. Durch die Erkennung spezifischer Antigene hilft sie Pathologen dabei, Erkrankungen genau zu diagnostizieren, Krebsstadien zu bestimmen und sogar die beste Behandlungsmethode festzulegen. Obwohl das Verfahren nicht invasiv ist, kann die Entnahme der Gewebeprobe eine sorgfältige Vorbereitung und medizinisches Fachwissen erfordern.

Das Verständnis des immunhistochemischen Prozesses, seiner Anwendung und der Interpretation der Ergebnisse kann sowohl Patienten als auch Gesundheitsdienstleistern dabei helfen, fundierte Entscheidungen hinsichtlich Diagnose und Behandlung zu treffen. Unabhängig davon, ob Sie sich einem IHC-Test zur Krebsdiagnose oder im Rahmen einer Forschungsstudie unterziehen, ist diese Methode ein Eckpfeiler der medizinischen Diagnostik und der laufenden Forschung.