Patologia Molecular

La patologia molecular és un camp de la patologia que utilitza els principis, tècniques i eines de la biologia molecular, que és una eina molt essencial per a la pràctica de la medicina de precisió.

Neoplàsies mieloides

• Leucèmia mieloide aguda.
• Neoplàsies mieloproliferatives.
• Síndromes mielodisplàsiques.
• Neoplàsies mielodisplàsiques/mieloproliferatives.
• Neoplàsies mieloides/limfoides amb eosinofília i reordenació gènica.
• Mastocitosi.

Neoplàsies limfoides

• Leucèmia/limfoma limfoblàstic B
• Leucèmia limfocítica crònica
• Neoplàsies de cèl·lules plasmàtiques
• Limfoma de cèl·lules B d'alt grau

L'ús de diferents tecnologies com la PCR en temps real, la hibridació in situ de fluorescència (FISH), l'anàlisi de fragments i la seqüenciació de nova generació (NGS) ajuda a caracteritzar amb precisió l'anormalitat genètica que causa la malaltia.

• La PCR permet l'amplificació de fragments d'ADN per facilitar la detecció. La PCR es pot utilitzar per buscar determinats canvis en un gen o un cromosoma, que poden ajudar a trobar i diagnosticar una condició genètica o una malaltia, com ara el càncer.
• La PCR en temps real comença amb una plantilla d'ADN/ARN (extreta de la mostra del pacient) i les dianes d'interès (per exemple, la mutació JAK2 en neoplàsies mieloproliferatives o transcripcions de fusió BCR-ABL en LMC) s'amplifiquen molts milions de vegades, que es poden detectar en temps real i informat qualitativament (detectat/no detectat) o quantitativament (p. ex. còpies/ml).
• FISH: mètode de citogenètica molecular/tècnica de laboratori per detectar i localitzar una seqüència específica d'ADN en un cromosoma, on les mostres es processen per facilitar la unió de l'ADN diana amb l'ADN de la sonda marcat amb fluorocrom, que permet la visualització posterior mitjançant un microscopi de fluorescència.
• Anàlisi de fragments: després de l'amplificació diana (PCR convencional), separació i visualització de fragments marcats amb fluorescència (ADN) en funció de la mida (per exemple, Microsatellite Inestability).
• NGS (seqüenciació de propera generació): permet la detecció simultània d'alteracions genètiques rellevants per al diagnòstic i el pronòstic en múltiples gens per als quals hi ha disponible una teràpia dirigida. L'assaig comença amb la preparació de la biblioteca i la plantilla resultant s'amplifica i s'enriqueix clonalment, que es seqüencia més. Les alteracions genètiques s'anoten mitjançant programari disponible comercialment que l'enllaça amb la teràpia rellevant, els assaigs clínics i el risc disponibles.

• Tumors sòlids:

  10 ng d'àcid nucleic d'entrada detecten objectius accionables a través de 52 gens. Si s'identifica un objectiu accionable, es dóna una teràpia dirigida, que s'adreça a gens i proteïnes específiques que estan implicades en el creixement i la supervivència de les cèl·lules canceroses sense afectar les cèl·lules normals. Funciona bloquejant els senyals de creixement essencials per a la proliferació de cèl·lules canceroses, accelera la seva destrucció i també disminueix la producció de nous vasos sanguinis necessaris per a la seva supervivència. Aquesta teràpia allargarà la supervivència del pacient i millorarà el resultat global del pacient. Ajuda en el diagnòstic de sarcomes de teixits tous, així com de petits tumors de cèl·lules rodones detectant l'anormalitat citogenètica característica.

• Neoplàsies mieloides:

  Des de detecta simultàniament totes les anomalies genètiques rellevants en 79 gens en un únic assaig en lloc de de manera seqüencial. Aquesta prova és molt útil per al diagnòstic de neoplàsies mieloides i la seva classificació segons la recomanació de la guia. Proporciona informació pronòstica sobre si el pacient necessitarà tractament estàndard o quimioteràpia a dosis altes o trasplantament de medul·la òssia per a la curació permanent. També ajuda a seleccionar els pacients per a la teràpia dirigida.

• Neoplàsies limfoides:

  Ajuda a l'estratificació del risc i orienta el tractament.