免疫染色

免疫染色是分子生物学和病理学中用于检测组织样本中特定蛋白质或抗原存在的一项重要实验室技术。通过利用抗体识别这些靶标，免疫染色可让科学家和医疗专业人员了解各种疾病的特征，包括癌症、自身免疫性疾病和传染病。这种方法在诊断病理学中特别有用，可帮助临床医生准确诊断疾病、确定癌症分期并监测治疗反应。

什么是免疫染色？

免疫染色（也称为免疫组织化学）是一种实验室技术，用于通过使用特异性结合这些抗原的抗体来检测组织切片细胞中的特定抗原（蛋白质）。这些抗体通常用可检测的标记物标记，例如荧光染料或暴露于底物时会产生颜色变化的酶。这使病理学家能够在显微镜下目视定位组织样本中特定蛋白质或标记物的存在。

免疫染色的原理是抗原抗体相互作用，抗体与特定抗原结合，形成抗原抗体复合物。抗体上附着的标记物使该复合物可视化。

免疫染色的主要特点

• 特异性： 免疫染色具有高度特异性，因为它针对特定细胞或组织中发现的独特标记（蛋白质）。
• 灵敏度： 它可以检测到非常少量的抗原，这使得它有助于在早期识别疾病。
• 视觉输出： 染色后的结果在显微镜下可见。这让病理学家能够清楚地了解组织样本。
• 多路复用： 先进的免疫染色技术可以同时检测多种抗原，这对于识别复杂的疾病或标志物非常有价值。

免疫染色如何起作用？

免疫染色过程通常涉及几个关键步骤：

1. 组织准备： 收集组织样本，例如活检或手术切除的组织样本。然后将组织固定在溶液中（通常是福尔马林），以保持其结构和完整性。固定后，将组织嵌入石蜡中并切成薄片。
2. 抗原修复： 固定过程有时会掩盖抗原，因此需要对组织切片进行处理以露出蛋白质。这个过程称为抗原修复，可能涉及加热或使用特殊化学品来揭开抗原的面纱。
3. 抗体的应用： 抗原修复后，将特异性抗体应用于组织。该抗体与目标抗原结合。例如，在癌症的情况下，特异性抗体可能用于结合 HER2（用于乳腺癌）或 PSA（用于前列腺癌）等标记物。
4. 检测： 抗体与抗原结合后，使用二抗。二抗通常与酶或荧光染料结合。酶与底物发生反应，产生颜色变化，可在显微镜下看到。在基于荧光的免疫染色中，染料在紫外线 (UV) 下产生荧光，从而生动准确地描绘出抗原的位置。
5. 分析： 然后，病理学家检查染色的组织，并根据染色模式、强度和位置解释结果。

为什么进行免疫染色？

免疫染色在医学诊断和研究中具有多种重要应用。进行免疫染色的一些最常见原因包括：

• 癌症诊断和分类： 免疫染色最重要的用途之一是肿瘤学。它通过识别肿瘤细胞上存在的特定标记物来帮助诊断不同类型的癌症。例如，HER2 是一种在某些乳腺癌细胞中过量的蛋白质，通过免疫染色识别它可以确定治疗方案。乳腺癌组织中的雌激素和孕激素受体也可以被识别，以确定激素疗法是否有效。
• 识别传染病： 免疫染色用于识别组织样本中的细菌、病毒或真菌等病原体。这种方法有助于检测活检样本中的 HIV、结核病和其他传染性病原体。直接观察组织中的病原体对于准确诊断和治疗至关重要。
• 自身免疫性疾病诊断： 免疫染色用于检测特定自身抗体并识别自身免疫性疾病，例如狼疮和类风湿性关节炎。例如，在系统性红斑狼疮 (SLE) 中，免疫染色可能有助于识别与肾脏中的特定蛋白质结合的抗体，这可能表明患有狼疮性肾炎。
• 分析组织结构： 免疫染色还有助于分析组织的结构和组成。这对于了解影响细胞结构的疾病（如神经退行性疾病或血管疾病）至关重要。它用于研究维持组织结构的细胞外基质和蛋白质。
• 监测疾病进展和治疗反应： 在某些疾病（如癌症或自身免疫性疾病）中，免疫染色可用于评估疾病的进展。例如，免疫染色可以监测特定肿瘤标志物的表达，以确定患者对治疗的反应程度。

如何准备免疫染色

免疫染色本身不需要患者进行任何特殊准备，因为它是一种应用于组织样本的实验室技术。但是，如果您正在接受活检或手术以收集样本进行免疫染色，则需要注意以下几点：

• 咨询和病史： 在进行活检或手术之前，医生可能会查看您的病史，以确定应使用哪种抗体进行免疫染色。如果您接受此测试以评估特定类型的癌症或疾病，请告知医生任何相关症状或家族病史。
• 活检或组织收集： 对于免疫染色，可能需要进行活检或手术切除以获取组织样本。如果进行活检，您的医疗保健提供者将解释该过程，根据组织样本的位置和大小，可能涉及局部麻醉、镇静或全身麻醉。
• 样品后处理： 样本采集后，将送往实验室进行处理和免疫染色准备。一旦采集了组织样本，患者无需进一步准备。

测试结果解读

免疫染色结果的解读基于组织样本中染色的存在和强度。以下是解读结果的方法：

• 积极的结果：
  • 强阳性染色： 指示组织中目标抗原或蛋白质的存在。染色的强度有助于确定抗原的丰度。
  • 特定染色模式： 组织染色的模式（例如，核、细胞质、膜）可以提供有关抗原在细胞中如何发挥作用的信息。
• 负面结果：
  • 无染色： 染色不明显表明目标抗原不存在或含量极低。阴性结果有助于排除特定疾病或病症。
• 染色位置的解释：
  • 细胞质染色： 表示抗原存在于细胞的细胞质中。
  • 核染色： 表明抗原存在于细胞核中，可能影响基因表达。
  • 膜染色： 表明抗原存在于细胞膜上，这可能与受体介导的过程有关。
• 量化： 免疫染色还可以帮助确定抗原的定量表达，为肿瘤分级提供有用的信息，其中较高的表达水平可能表明肿瘤更具侵袭性。

免疫染色的正常范围

由于免疫染色可识别特定蛋白质，因此没有像血液检测那样的标准“正常范围”。相反，正常结果基于组织样本中不存在异常标记。特定标记或蛋白质的存在（如乳腺癌中的 HER2 或淋巴瘤中的 CD 标记）将决定结果是正常还是表明有疾病。

免疫染色的用途

免疫染色在诊断和治疗各种医疗状况中起着至关重要的作用：

• 癌症诊断： 它用于识别肿瘤标志物并对癌症进行分类，例如乳腺癌、前列腺癌和淋巴瘤。
• 传染性疾病： 有助于检测组织样本中的病毒、细菌和真菌等病原体。
• 自身免疫性疾病： 用于识别自身抗体和诊断自身免疫性疾病。
• 研究： 广泛用于研究疾病机制、确定治疗目标和开发新治疗方法。
• 组织成分： 用于检查组织的结构元素，有助于研究血管疾病、神经退行性疾病和器官功能障碍。

关于免疫染色的 10 个常见问题

1. 什么是免疫染色？ 免疫染色是一种实验室技术，利用抗体检测组织样本中的特定蛋白质。这些抗体与目标抗原结合，反应在显微镜下可见。
2. 免疫染色如何起作用？ 免疫染色的原理是应用特异性结合组织样本中蛋白质（抗原）的抗体。这些抗体带有标记，可产生可见反应，如颜色变化或荧光。
3. 免疫染色可以诊断哪些病症？ 免疫染色可用于诊断癌症，例如乳腺癌、肺癌和淋巴瘤。它还可用于诊断自身免疫性疾病，例如狼疮和类风湿性关节炎，以及检测感染。
4. 免疫染色有多准确？ 免疫染色具有高度准确性，并提供有关组织中某些标记物存在的具体信息，可帮助病理学家准确诊断疾病和分类癌症。
5. 免疫染色会疼痛吗？ 免疫染色本身并不痛苦，因为它是在实验室中对组织样本进行的。然而，获取样本（例如通过活检）可能会带来轻微的不适。
6. 免疫染色需要什么类型的样本？ 免疫染色需要组织样本，通常通过活检或外科手术获得。在某些情况下，也可能使用血液或体液样本。
7. 免疫染色阳性结果意味着什么？ 阳性结果意味着在组织样本中检测到了目标抗原或蛋白质。这可以帮助诊断特定类型的癌症或识别与某些疾病相关的标志物。
8. 免疫染色阴性结果意味着什么？ 阴性结果意味着在组织中未检测到抗原，这有助于排除某些疾病或病症。
9. 需要多长时间才能获得免疫染色的结果？ 免疫染色的结果通常需要几天到一个星期的时间，取决于测试的复杂性和被检查的标记的数量。
10. 免疫染色可以用于治疗决策吗？ 是的，免疫染色对于确定治疗方案至关重要，尤其是在癌症治疗中。例如，乳腺癌中 HER2 的存在可以决定患者是否会从 HER2 靶向疗法中受益。

结语

免疫染色是医学上不可或缺的诊断工具，有助于检测组织样本中的特定蛋白质和抗原。它在癌症诊断、自身免疫性疾病、感染和研究中有着广泛的应用，使其成为病理学家和研究人员的必备技术。无论是用于癌症亚型分类、自身免疫性疾病诊断还是监测治疗反应，免疫染色都能提供关键信息，指导医疗决策并改善患者预后。

免疫染色能够识别低水平的目标蛋白，因此它不仅是诊断疾病的工具，也是了解疾病背后的分子和细胞机制的工具。如果您正在接受免疫染色或准备进行相关的活检或组织检查，请与您的医疗保健提供者讨论该程序，这将有助于确保您了解潜在的益处以及结果将如何影响您的治疗选择。